在化学中，分光光度法是定量测量材料的反射或透射特性作为波长的函数。它比通用术语电磁光谱更具体，因为分光光度法处理可见光、近紫外和近红外，但不包括时间分辨光谱技术。

　　分光光度法使用光度计，称为分光光度计，它可以测量光束的强度作为其颜色(波长)的函数。分光光度计的重要特征是光谱带宽(它可以通过测试样品透射的颜色范围)、样品透射百分比、样品吸收的对数范围，有时还有反射率测量的百分比。

　　分光光度计通常用于测量溶液、透明或不透明固体(如抛光玻璃)或气体的透射率或反射率。尽管许多生化物质是有色的，例如它们吸收可见光，因此可以通过比色程序进行测量，但即使是无色的生化物质通常也可以转化为适合显色成色反应的有色化合物，从而产生适合比色分析的化合物。然而，它们也可以设计为使用不同的控制和校准来测量通常覆盖约200nm至2500nm 的任何列出的光范围的扩散率。在这些光范围内，需要使用根据光度测定波长而不同类型的标准在机器上进行校准。

　　使用分光光度法的实验的一个例子是确定溶液的平衡常数。溶液中的某种化学反应可以正向和反向发生，其中反应物形成产物，产物分解成反应物。在某个时刻，这种化学反应会达到一个平衡点，称为平衡点。为了确定此时反应物和产物的各自浓度，可以使用分光光度法测试溶液的透光率。通过溶液的光量表示不允许光通过的某些化学物质的浓度。

　　光的吸收是由于光与分子的电子和振动模式的相互作用。每种类型的分子都有一组与其化学键和原子核的组成相关的单独的能级，因此会吸收特定波长或能量的光，从而产生独特的光谱特性。这是基于其特定和独特的构成。

　　分光光度计的使用跨越多个科学领域，如物理学、材料科学、化学、生物化学和分子生物学。它们广泛用于许多行业，包括半导体、激光和光学制造、印刷和法医检验，以及用于研究化学物质的实验室。分光光度法通常用于测量酶活性、确定蛋白质浓度、确定酶动力学常数和测量配体结合反应。最终，分光光度计能够根据控制或校准来确定目标中存在哪些物质，以及通过计算观察到的波长来准确确定物质的含量。