分光光度计是一种实验室仪器,用于测量特定波长的光的电磁能。每种化合物都具有吸收、反射和透射电磁波谱波长的光的能力。当光透过它们时,一小部分光被吸收。分光光度计有助于样品的定性和定量分析。随着物质浓度的增加,光吸收增加,透光率降低。
该仪器可用于化学、生物化学(用于酶催化反应)、物理学、生物学和临床研究(检查血液学或组织)。对于科学家来说,在没有任何表面接触的情况下检查各种样品非常有用,因为样品被封装在一个称为比色皿的小管中,或者在光电管的情况下,估计会立即在样品容器中进行,而无需转移它。
用于样品的定性分析
用于生物化学的定量分析,例如确定未知给定样品的浓度
用于酶测定
确定特定样品的分子量,例如苦味酸胺、酮化合物、醛和糖
用于鉴别杂质
检测供应样品的浓度
阐明有机化合物的结构
确定蛋白质的特性
确定水体中溶解氧的量
分析医院的呼吸气体
用于检测功能组
确定特定化合物的分子量
用于确定化合物的类别
用于Bial的戊糖浓度测试
估计溶解的有机碳浓度
用于衡量芳香度的特定紫外吸光度
分光光度计设备有助于测量作为波长函数的光强度。它的工作原理是将光束衍射成不同波长的光谱,然后在电荷耦合装置的帮助下检测强度,并将结果以图形的形式显示在检测器上,然后显示在显示装置上。
在分光光度计中,光束通过使用将入射光束衍射成不同波长的棱镜进行分离。该设备可以轻松测量化合物的吸收光谱,即溶液对每个波长的光的吸收。
分光光度计是基于浊度测定的原理。浊度或光密度是悬浮液的混浊度。悬浮液越混浊,透过它的光就越少。换句话说,吸收和散射的光量与光路中细胞的质量成正比。随着细菌在肉汤中生长,清汤变得浑浊。由于浊度随着细胞数量的增加而增加,因此该指标用作肉汤中细菌密度的指标。浊度也可用于标准化具有临床意义的细菌培养物的种群密度。
分光光度计包含以下组件;
光源:光源需要在分光光度计内产生光。该材料用于光源;它应该通过高压放电(或)通过电加热被激发到高能状态,以作为优良的辐射能源。
准直器(透镜):该透镜将光从光源指向单色器或棱镜。
单色仪(棱镜或光栅):它用于将多色辐射分离成分量波长(或)波长带。单色仪将多色辐射确定为其各个波长,并将这些波长隔离为非常窄的波段。
波长选择器(狭缝):它从分离的波长中选择特定波长的光,并将其通过比色皿。
运输容器(比色皿):比色皿用于盛放待研究的样品。它由石英制成。
光敏探测器和相关的读出系统:大多数探测器依赖于光电效应。然后,电流与光强度成正比,因此是光强度的量度。辐射探测器有助于产生与发射器光等效的电子信号。这些信号需要转换成易于解释的形式。这是通过使用放大器、电流表、电位计和电位记录仪来实现的。
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