分光光度计可以安装在许多研究、生物学、化学和工业实验室中。分光光度计用于不同科学领域的研究和数据评估。它提供了高度的精度、灵敏度和准确度。此外，它价格低廉，适用于多种物质的测量。分光光度计的作用是传输和接收光。分光光度计用于通过使用样品的光通过并研究波长的强度来评估测试材料的样品。

　　不同的样品以多种不同的方式修改光，这使研究人员可以通过观察光通过样品时的传导变化来获得有关检查内容的更多事实。

分光光度计的组成

　　有不同类型的分光光度计可用，但它们在结构和部件上都有相似之处。在了解分光光度计的工作原理之前，让我们概述一下该设备的组件。

　　灯：光源

　　单色器：隔离光源特定波长带的一种方法，提供单色光，即所有光子具有相同波长的光

　　比色皿或细胞：样品架

　　探测器：测量光强的装置

　　显示：显示样品的透射率和吸光度

分光光度计的工作原理

　　电磁辐射(光)与物质之间存在相互作用。分光光度计由两个仪器组成，即用于产生任何选定颜色(波长)的光的分光计和用于测量光强度的光度计。通过管的光量由光度计测量。光度计将电压信号传送到显示设备，该信号随着液体吸收的光量的变化而变化。

　　分光光度计的性能数据

　　这些仪器最重要的性能特点是：

　　可测量的量(例如仅吸光度，或吸光度和反射率);

　　可访问的光谱范围，理想的是 UV – VIS – IR;

　　光谱分辨率(固定或可变，通常受单色仪限制);

　　吸光度范围(受光源和检测器灵敏度限制);

　　给定光谱范围和分辨率的测量时间;

分光光度计如何工作?

　　以下是分光光度计的工作原理。将样品溶液置于分光光度计内。一盏灯提供光源。光束撞击衍射光栅，衍射光栅像棱镜一样工作，并将光分成其分量波长。一个可调节的狭缝只允许一种特定波长的光通过样品溶液。然后光与样品相互作用。光的波长照射样品，样品保存在比色皿中。我们在处理比色皿时需要小心;即使是轻微的指纹也会干扰结果。从这一点开始，检测器测量样品的透射率和吸光度。

　　透射率是指完全通过样品并照射到检测器的光量。吸光度是对样品吸收的光的测量。检测器感应穿过样品的光，并将此信息转换为输出屏幕上的数字显示。

　　使用分光光度计的步骤

　　预热分光光度计时，机器中不应有比色皿;

　　样品制备;

　　一系列已知浓度的标准溶液;

　　将分光光度计设置为最大光吸收波长。测量标准的吸光度;

　　将光的百分比透射率设置为 0%;

　　在样品空间中，放置一个装满溶剂的比色皿并关闭样品空间;

　　将透射率设置为 100%;

　　为了比较，用样品填充比色皿并将其放置在样品空间中并关闭样品空间;

　　记下光度计上的读数以进行计算;

　　绘制标准曲线：吸光度与浓度;

　　使用 Beer-Lambert 方程计算样品浓度：A = ECL;