可见分光光度计是用于检测和跟踪被测物质对可见光吸光度进行定量分析的仪器设备。

工作原理

　　溶液中的物质受下，溶液中的物质对光的吸收有选择性的影响。各种不同的物质都有自己的吸收光谱，所以当单色光通过溶液时，它的能量会被吸收和减弱，光能的减弱程度与物质浓度有一定的比例，即符合朗伯一比尔定律(见图片3-10)。

　　当液体的光程长度保持不变时，通过光根据溶液的浓度而变化。可见，分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象设计的。

分光光度计仪器的结构

　　分光光度计由磁饱和稳压器、单色器和检流计三部分组成。使用时，应使用导线3-11接好。

　　单色器和稳压器的输出接线柱5.5V或10V连接，然后根据导电片上套管的颜色，将单色器连接到检流计，红色套管的导电片连接到十，绿色套管的导电片连接到一，第三个导电片接地线。稳压器和检流计分别连接220V电源。

光栅分光光度计的结构

　　光栅分光光度计采用自准色散系统和单光束结构，色散元件为衍射光栅，波长为330~800nm数字显示读数也可以直接测量溶液的浓度。其形状如图所示3-12所示。

使用分光光度计的方法

　　(1)在连接电源之前，稳压器、检流计和单色器的电源开关应关闭。光量调节器逆时针转向最小位置，单色器光门拨打黑点，然后连接稳压器和检流计220V交流电源。

　　(2)打开检流计电源开关，从断开到直接或直接X1档，指示光点出现在标尺上，用零位调节器准确地将光标调整到透光标尺的0点。

　　(3)打开稳压器和单色器的电源开关，将光闸拨到红色点，然后顺时针旋转光调节器，使检流计的指示光标线达到标尺上透光率的100%附近，并进行预热10min光标稳定后再使用。(4)将波长调节器调整到所需的波长。

　　(5)将单色器的光闸门拨到黑点，再次检查检流计的零位(即透光率为0)。

　　(6)将盛有空白溶液的比色皿放入比色皿架的第一格中，剩下的=放入待测溶液，盖上暗箱盖，将空白溶液推入光路(拉杆推到底)。将光闸拨到红点，轻轻调节光量调节器，将光标准确调节到透光率100读数。

　　(7)拔出拉杆，使有色溶液进入光路，光标所指A值是溶液的吸光度，然后依次测量其他溶液。

　　(8)测量完成后，取出比色皿，倒出溶液，用蒸馏水冲洗干净，吸干，放回比色皿盒中。所有旋钮和开关恢复到使用前状态，切断电源，覆盖仪器。

注意

　　1)打开电源前，检查每个调整旋转问题是否在起始位置，然后打开电源开关。仪器停止工作时，必须将开关放在关闭上，然后切断电源。

　　2)只要空白溶液的透光率能调整到100，单色器的电源电压应用5.5V,不用10V。这主要是为了延长光源灯的使用寿命，降低单色器的温度。

　　3)检流计背面有两个电源插孔，分别标有220V”和“6V”。若用220V交流电源时，导线插头应桥入220V孔内，人用6V直流电源应插入导线插头6V孔内，不要插错。否则，仪器将被烧坏。

　　4)在仪器使用过程中，应注意光电池的保护，长期选择·间照而疲劳。更换溶液并记录读数时.将光闻门及时拔到黑点，切断射光。

　　5)注意保护比色皿透光面的清洁度。使用时只能用手拿毛玻璃面，不要拿透光面。据擦拭外部溶液时，只能使用镜头纸。

　　6)比色皿盛放溶液不能超过其高度的4/5,以免溶液溢入机件内部。

　　光栅分光光度计的使用方法

　　(1)连接电源前，检查仪器的安全性。电源线接线应牢固，接地线接地应良好，各调节旋钮的起始位置应正确，然后连接电源。

　　(2)将灵敏度派或调整到1档(最小放6倍率)。调波长调节器至所需波长。

　　(3)打开电源开关，指示灯亮，选择开关放在‘’T调整透光率100%旋钮，使数字显示100.0左右，预热20min。

　　(4)打开吸收地暗室盖(光门自动关闭)，调整0旋钮，使数字显示为000.0盖上吸收地盖，将参考溶液放在光路中，使光电管受光，调整透光度100%旋钮，使数字显示为100.0”。

　　(5)如果不显示100，可以适当增加电流放大器的灵敏度档数，但应尽量使用低档数，使仪器稳定性更高。改变灵敏度后，必须重新校正0和100。

　　(6)连续几次按(4)调整00.0在100和100之后，将选择开关放在A调整吸光度，调整零旋钮，使数字显示为.000”。然后将待测溶液推入光路,显示值即为待测样品的吸光度值A。

　　(7)浓度c测量。开关的选择由A”旋至“c将标准溶液推入光路，调整浓度旋钮。使数字显示值为已知的标准溶液浓度值。将待测样品晶体溶液推入光路，读取待测样品的浓度值。

　　(8)在大幅度改变测试波长时，调整00.0和100等一会儿(由于光能变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需要一段光响应平衡时间)，稳定后重新调整00·0和100一起工作。

　　注意:

　　1)使用前，用户应首先了解仪器的结构和原理，以及每个旋钮的功能。

　　2)仪器接地良好，否则显示数字不稳定。

　　3)仪器左下角有干操剂筒，应保持干燥，干操剂变色后应立即更新或干燥。

　　4)仪器停止工作时，切断电源，同时切断电源开关，并密封仪器。

　　以上介绍了可见分光光度计的工作原理、结构外观和使用方法，希望为行业相关试用人员提供一些参考。